活體成像技術(shù)主要是利用一套非常靈敏的光學(xué)檢測(cè)儀器,能夠直接監(jiān)控活體生物體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為。通過(guò)這個(gè)系統(tǒng),可以觀測(cè)活體動(dòng)物體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移,感染性疾病發(fā)展過(guò)程、特定基因的表達(dá)等生物學(xué)過(guò)程。其優(yōu)點(diǎn)為較傳統(tǒng)屠宰動(dòng)物相比,該技術(shù)能夠?qū)ν环N實(shí)驗(yàn)對(duì)象在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行記錄,跟蹤同一觀察目標(biāo)(標(biāo)記細(xì)胞及基因)的移動(dòng)及變化,所得的數(shù)據(jù)更加真實(shí)可信。目前主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術(shù)。
1:技術(shù)原理
活體生物發(fā)光技術(shù)是指在小的哺乳動(dòng)物體內(nèi)利用報(bào)告基因(如熒光素酶基因)表達(dá)所產(chǎn)生的熒光素酶蛋白與其小分子底物熒光素在氧、Mg2+離子存在的條件下消耗ATP發(fā)生氧化反應(yīng),將部分化學(xué)能轉(zhuǎn)化為可見(jiàn)光能釋放,然后在體外利用敏感的CCD設(shè)備形成圖像。熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒可以被插入多種基因的啟動(dòng)子,成為某種基因的報(bào)告基因,通過(guò)檢測(cè)報(bào)告基因從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)基因的監(jiān)測(cè)。
生物熒光其本質(zhì)為化學(xué)熒光,熒光素被熒光素酶氧化的過(guò)程中可以釋放波長(zhǎng)廣泛的可見(jiàn)光光子,其波長(zhǎng)范圍為460-630nm(平均波長(zhǎng)為560nm)。在哺乳動(dòng)物體內(nèi)血紅蛋白是吸收可見(jiàn)光的主要成分,能吸收藍(lán)綠光波段中的大部分可見(jiàn)光;水和脂質(zhì)主要吸收紅外線,但其均對(duì)波長(zhǎng)為590-800nm的紅光近紅外線吸收能力較差,因此波長(zhǎng)超過(guò)600nm的紅光雖然有部分散射消耗但大部分可以穿透哺乳動(dòng)物組織被高靈敏的CCD檢測(cè)到。

2:應(yīng)用范圍
癌癥與抗癌藥物研究;免疫學(xué)與干細(xì)胞的研究;細(xì)胞凋亡;病理機(jī)制及病毒研究;基因表達(dá)和蛋白質(zhì)之間相互作用;轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型構(gòu)建;藥效評(píng)估;藥物甄選與預(yù)臨床檢驗(yàn);藥物配方與劑量管理;腫瘤學(xué)應(yīng)用;生物光子學(xué)檢測(cè);視頻監(jiān)督與環(huán)境監(jiān)督等。
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